Invitrogen™ Reactivo de viabilidad celular HS alamarBlue™

Descripción

Al entrar en las células vivas, la resazurina se reduce a resorufina, un compuesto de color rojo y muy fluorescente. La alta fluorescencia de fondo que causan varios contaminantes reduce el rendimiento de los reactivos a base de resazurina. Para mejorar el rendimiento, se desarrolló un proceso de purificación innovador que elimina estos contaminantes. Esta resazurina altamente purificada y no tóxica se utilizó en la formulación alamarBlue estándar, con lo que se creó el reactivo de viabilidad celular alamarBlue HS de varios componentes. Los cambios en la viabilidad se pueden detectar fácilmente utilizando un lector de placas basado en absorbencia o fluorescencia. El reactivo de viabilidad celular alamarBlue HS tiene amplia aplicabilidad y se puede usar con varias líneas celulares humanas y animales, bacterias, plantas y hongos.

Las características del reactivo de viabilidad celular alamarBlue™ HS incluyen:

• Eliminación de contaminantes de la resazurina: muestra una reducción de > 50 % en fluorescencia de fondo
• Relación señal-fondo aumentada en > 100 %: da como resultado una gran ventana de señal de ensayo
• Reactivo altamente sensible con una respuesta lineal: detecta un mínimo de 20 células por pocillo
• Formato práctico de adición y lectura: sin mezcla, ni lavado, ni lisis celular, y compatible con instrumentación basada en fluorescencia o absorbancia
• Mide la viabilidad de tipos de células muy diversos: entre los que se incluyen las células de mamíferos, las bacterias, las plantas y los hongos

La medición de los cambios en la viabilidad celular es un método fundamental para evaluar la salud celular, determinar la genotoxicidad y evaluar fármacos anticancerígenos. La salud celular se puede controlar mediante la detección de cambios en diversos indicadores clave, incluidos cambios en la integridad de la membrana plasmática, síntesis de ADN, contenido de ADN, actividad enzimática, presencia de ATP y entorno de reducción celular.

El control de los cambios en el entorno de reducción celular o la actividad metabólica mediante el uso de reactivos basados en resazurina es un indicador bien establecido y fiable de la viabilidad o la muerte celular. Al entrar en las células vivas, el ambiente de reducción celular reduce la resazurina a resorufina, un compuesto de color rojo y muy fluorescente. Las células viables convierten continuamente la resazurina en resorufina, lo que aumenta la fluorescencia general del medio que rodea a las células. Además, la conversión de la resazurina a resorufina produce un cambio de color pronunciado, por lo que la viabilidad celular también se puede detectar mediante lectores de placas basados en absorbancia.

Como consecuencia de los procesos de síntesis y fabricación, todos los reactivos basados en la resazurina contienen una cantidad detectable de contaminación por resorufina. La cantidad de contaminación puede variar considerablemente entre las fuentes del material y las condiciones de fabricación, lo que contribuye a las diferencias en la fluorescencia de fondo detectable. Lo que es más importante, la resorufina contaminante reduce la relación señal-fondo y el rango dinámico del ensayo. Se desarrolló un proceso innovador que elimina la resorufina contaminante, lo cual genera la resazurina de alta pureza utilizada en el reactivo de viabilidad celular alamarBlue HS.

El reactivo de viabilidad celular alamarBlue HS es un reactivo completo de adición y lectura no tóxico que no requiere lisis celular. La resazurina altamente purificada que se utiliza para el reactivo alamarBlue HS produce una disminución de > 50 % en la fluorescencia de fondo y un aumento de > 100 % en la relación señal-fondo. Dado que no se requiere lisis, la solución alamarBlue HS diluida se puede retirar y reemplazar con un medio de crecimiento completo para un cultivo de las células adicional. Al igual que el reactivo alamarBlue, el reactivo alamarBlue HS muestra una ventana de tiempo de detección de viabilidad ampliada para una amplia variedad de organismos y, por lo tanto, se puede utilizar con varias líneas de células humanas y animales, bacterias, plantas y hongos, lo que resulta en la medición cuantitativa de la viabilidad y proliferación celular.