Invitrogen™ Inhibidor de la ARNasa de Ambion™, clonado, 40 U/μl

Descripción

El inhibidor de la ARNasa Ambion, una proteína humana recombinante producida en E. coli, es un potente inhibidor de las enzimas neutras de ARNasa pancreática de tipo A. El modo de inhibición es no competitivo; el inhibidor une fuertemente las ARNasas en una proporción 1:1. Se ha demostrado que la enzima inactiva los ARNasas presentes en muchos tejidos y tipos celulares. Se ha demostrado que la adición del inhibidor de ribonucleasa (IR) es útil cuando se debe mantener la integridad del ARN, como en la preparación del ADNc mediante transcripción inversa, la transcripción de ARN in vitro y la síntesis de proteínas in vitro. El inhibidor de ribonucleasa (IR) no inhibe la RNasa I, T1, T2, H, U1, U2 o CL3. El inhibidor de ribonucleasa (IR) requiere un mínimo de 1 mM de DTT para mantener la actividad, y tiene un intervalo de actividad entre pH 5,0 y 8,0 con una actividad máxima entre pH 7,0 y 8,0. Dado que el modo de inhibición es la formación de un complejo 1:1 con ARNasas, se debe tener cuidado para evitar la desnaturalización u oxidación del inhibidor de la ribonucleasa (por ejemplo, mediante la adición de SDS, urea, etc.). Se debe añadir IR a las reacciones de transcripción, traslación y síntesis de ADNc para dar una concentración final de 1 U/μl. El inhibidor de la ARNasa se somete a rigurosas pruebas para detectar la contaminación de la ARNasa, exonucleasa, endonucleasa y la actividad de la proteasa.
Definición de unidad: Una unidad es la cantidad de proteína necesaria para inhibir la actividad de 5 ng de ARNasa A en un 50 %. Condiciones del ensayo de la unidad: 100 mM de tris-acetato (pH 6,5), 1 mM de EDTA, 1 mM de 2’, 3’-CMP cíclico e inhibidor de ARNasa. La adición de ARNasa A inicia la reacción. La actividad del inhibidor de ARNasa se mide por la inhibición de la hidrólisis de 2’, 3’-CMP cíclico por la ARNasa A.

Aplicaciones:

Análisis de expresión génica y genotipado, transcripción in vitro, PCR y PCR en tiempo real, PCR en tiempo real (qPCR), transcripción inversa

Información de órdenes

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