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Invitrogen™ CloneMiner™ II cDNA Library Construction Kit
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Cantidad:
1 kit
Tamaño de la unidad:
cada uno
Descripción
El kit de construcción de bibliotecas de ADNc CloneMiner™ II es un kit de segunda generación CloneMiner™ que permite la construcción rápida de bibliotecas de ADNc altamente representativas sin la clonación de enzimas de restricción. Esta innovadora tecnología de construcción de bibliotecas combina la transcriptasa inversa SuperScript™ III con la tecnología de clonación Gateway™, resultando en el descubrimiento de clones de longitud completa que antes no se podían obtener. El kit también evita el uso de reacciones de ligación que consumen mucho tiempo y son ineficientes, haciendo que la construcción de la biblioteca sea más rápida y ofreciendo una mejor representación.
El kit de construcción de bibliotecas de ADNc CloneMiner™ II garantiza:
Títulos primarios elevados
Insertos de un tamaño grande de media
Porcentaje más alto de genes de longitud completa
Clonación altamente eficiente de ADNc a múltiples vectores de destino sin necesidad de restricción de digestión enzimática ni ligación
Cómo funciona el kit CloneMiner™ II:
Alta producción de ADNc de longitud completa: El kit CloneMiner™ II contiene SuperScript™ III para generar altas producciones de ADNc. La transcriptasa inversa SuperScript™ III (RT), mutante exclusiva de SuperScript™ II RT es activa a 50 °C y tiene una vida media de 220 minutos. También tiene una mutación puntual que reduce la actividad de la ARNasa H, disminuyendo la degradación del ARN durante la síntesis de la primera cadena y aumentando el porcentaje de genes de longitud completa.
La tecnología de clonación Gateway™ evita la clonación de enzimas de restricción: La construcción de la biblioteca está mediada por tecnología Gateway™, un sistema de recombinación del punto específico que elimina el uso de enzimas de restricción y ligasas en la clonación. Cada inserto de ADNc está flanqueado por puntos de recombinación att específicos (añadidos durante los pasos de síntesis de ADNc) que se recombinan con puntos de att complementarios presentes en vectores de donantes Gateway™ para crear clones de entrada. Los clones de entrada se vuelven a combinar posteriormente con vectores de expresión Gateway™ para crear clones de expresión, reemplazando eficazmente el uso de enzimas de restricción y ligasa. Los clones resultantes mantienen la orientación y el marco de lectura originales permitiendo el análisis funcional de genes de longitud completa y bibliotecas completas.
¿En qué se diferencia este kit del kit CloneMiner™ original?
El nuevo kit incorpora un protocolo simplificado.
Para asegurar una alta producción de ADNc, la transcriptasa inversa SuperScript™ II (RT) se ha reemplazado por la transcriptasa inversa SuperScript™ III.
Para permitir la configuración de la reacción con menos pasos de pipeteo, la mezcla de enzimas Gateway™ BP Clonase™ se ha reemplazado por la mezcla de enzimas Gateway™ BP Clonase™ II, que contiene enzimas y tampón en una sola mezcla.
El kit de construcción de bibliotecas de ADNc CloneMiner™ II garantiza:
Cómo funciona el kit CloneMiner™ II:
¿En qué se diferencia este kit del kit CloneMiner™ original?
Especificaciones
Especificaciones
| Tipo de producto | Kit de preparación de bibliotecas |
| Contenido y almacenamiento | El Kit CloneMiner™ II incluye SuperScript™ III RT, vectores Gateway™, reactivos para la construcción de bibliotecas de ADNc y células competentes resistentes a los fajes T1 ElectroMax™ DH10B™. Consulte el manual para obtener más información. Almacene las células competentes resistentes a fago T1 ElectroMax™ DH10B™ a – 80 °C, las columnas de fraccionamiento de tamaño ADNc a + 4 °C, todos los demás componentes del kit a – 20 °C. |
| Cepa bacteriana o de levadura | DH10B |
| Método de clonación | Puerta de enlace |
| Tipo de producto final | Biblioteca de ADNc |
| Transcriptasa inversa | SuperScript™ III |
| Vector | pDONR222 |
| Formato | Kit |
| Línea de productos | CloneMiner |
| Para utilizar con (aplicación) | Bibliotecas de ADNc y construcción de bibliotecas |
| Mostrar más |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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