Invitrogen™ Dynabeads™ M-280 activados por tosilos

Descripción

Cuando desee acoplar covalentemente anticuerpos, péptidos, proteínas intactas y enzimas funcionales a la superficie de un gránulo magnético, elija los gránulos Dynabeads™ activados por tosilos. La orientación óptima de anticuerpos convierte a estos gránulos en una opción excelente para la inmunoprecipitación de proteínas y de complejos de proteínas.

Ideal para la inmunoprecipitación de complejos de proteínas:
El bajo fondo y la unión covalente de los anticuerpos a la superficie de los gránulos convierten a los gránulos Dynabeads activados por tosilos en una opción excelente para la inmunoprecipitación de proteínas y complejos de proteínas (coinmunoprecipitación, Co-IP). La concentración magnética suave y rápida de los gránulos y los cortos tiempos de incubación (posibles gracias a la rápida cinética de unión basada en superficie) convierten a los gránulos Dynabeads activados por tosilos en una opción excelente para la inmunoprecipitación de complejos de proteínas muy lábiles o transitorios (de corta duración).

Protocolos ultrarrápidos:

• Identifique miembros de complejos de proteínas en minutos en lugar de horas
• Resolución temporal lo bastante corta como para identificar complejos lábiles y transitorios
• Identifique elementos de unión que no se pueden identificar con protocolos más largos
• Protocolos rápidos para reducir aún más la unión de fondo extraordinariamente baja
• Relaciones más intensas de señal-ruido

Aplicaciones:

• Inmunoprecipitación (IP) de proteínas y complejos de proteínas
• Acople enzimas funcionales a la superficie del gránulo para ensayos posteriores
• Acople péptidos a la superficie del gránulo para identificar agentes ligantes

Purifique péptidos, proteínas y enzimas que:

• Son temporalmente estables
• Están estructuralmente intactos
• Tienen una temperatura lábil
• Se encuentran en su conformación nativa y son funcionales

Esbozo del procedimiento de acoplamiento:
El acoplamiento covalente se realiza durante la noche mediante la incubación del ligando deseado con los gránulos Dynabeads activados por tosilos. Los ligandos acoplados a los gránulos Dynabeads activados por tosilos incluyen comúnmente péptidos y proteínas (por ejemplo, anticuerpos de inmunoprecipitación o coinmunoprecipitación). El acoplamiento se produce en un entorno de pH neutro a elevado y a 37 °C. Recomendamos el acoplamiento con un pH entre 8,5 y 9,5, pero con ligandos lábiles de pH, el acoplamiento se puede realizar en un tampón alternativo con un pH de 7,4.

Tras la finalización del paso de acoplamiento de ligandos, el revestimiento de la superficie real de los gránulos Dynabeads activados por tosilos será inerte, lo que se traduce en una unión inespecífica baja.

Acerca de Dynabeads:
Dynabeads son unos gránulos superparamagnéticos monodispersos no porosos. Son muy móviles en la solución, lo que permite a los ligandos acoplados a los gránulos interactuar de manera continua con todo el volumen de muestra. Los gránulos superparamagnéticos son atraídos a las paredes del tubo mediante la transferencia del tubo a una gradilla con un campo magnético intenso. Los intensos campos magnéticos atraen rápidamente los gránulos a la pared del tubo, lo que permite una fácil y completa eliminación del sobrenadante mediante pipeteado. Los pasos de lavado se realizan de forma similar.

Características de la superficie de los gránulos Dynabeads activados por tosilos:

• grupos de P-tolueno-sulfonil (tosilo)
• Hidrófobos, pH neutro
• Unión covalente por grupos de aminas primarias (NH2) o de sulfhidrilo (SH)

Capacidad de unión por gránulos de miligramos:
Varía según el ligando (por ejemplo 5-10 µg de IgG)