Thermo Scientific™ Kit de clonación de productos duplicados mediante PCR CloneJET

Descripción

El kit de clonación de productos duplicados mediante PCR CloneJET es un sistema de selección positiva avanzado para la clonación de alta eficiencia de productos de PCR generados con cualquier ADN polimerasa termoestable. Se puede clonar cualquier fragmento de ADN con extremos cohesivos o romos. Es ideal para fragmentos de ADN fosforilados o no fosforilados. La ligadura al vector de selección positiva incluido solo tarda unos 5 minutos y produce más del 99 % de clones recombinantes. Los productos de PCR con extremos romos generados con una enzima de corrección se ligan directamente al vector de clonación.

Los productos de PCR generados con ADN polimerasas que no son de corrección o con mezclas de ADN polimerasas se despuntan antes de la ligadura en cinco minutos con la enzima de conversión en extremos romos de ADN termostable que incluye el kit. Todas las cepas de E. coli comunes de laboratorio se pueden transformar directamente con el producto de ligadura.

Características destacadas

El kit de clonación de productos duplicados mediante PCR CloneJET contiene un novedoso vector de clonación de selección listo para su uso pJET1.2/blunt. El vector contiene un gen de las enzimas de restricción letal que se interrumpe al ligar un inserto de ADN en el punto de clonación. Como resultado, solo las células bacterianas con plásmidos recombinantes pueden formar colonias. Las moléculas del vector pJET1.2/blunt recirculadas que no disponen de insertos se expresan mediante una enzima de restricción letal, que mata la célula de E. coli huésped después de la transformación. Esta selección positiva acelera drásticamente el proceso de detección de colonias y elimina los costes adicionales necesarios para la selección de color azul/blanco.

Para una mayor comodidad en el mapeo y manipulación del inserto, el sitio de clonación múltiple del vector de clonación pJET1.2/blunt contiene dos secuencias de reconocimiento BglII que flanquean el sitio de inserción. Además, el vector contiene un promotor T7 para las transcripciones in vitro e in vivo, así como para la secuenciación del inserto.

Características destacadas

• Rápido: Clonación de PCR en solo 5 minutos
• Máxima eficiencia: > 99 % de clones positivos
• Sin fondo de clonación: vector de selección positiva
• Versátil: idóneo para clonación de extremo romo o adherente
• Económico: evita los costes de detección azul/blanco