Thermo Scientific™ Kit de síntesis de la primera cadena de ADNc RevertAid

Descripción

El kit de síntesis de la primera cadena de ADNc RevertAid es un sistema completo para la síntesis eficaz de la primera cadena de ADNc a partir de moldes de ARN. El kit es adecuado para la síntesis de ADNc de hasta 13 kb. El inhibidor de ARNasa RiboLock que se suministra con el kit protege eficazmente los moldes de ARN de la degradación.

El kit de síntesis de la primera cadena de ADNc RevertAid se suministra con cebadores hexaméricos aleatorios y oligo(dT)₁₈. El primer oligo(dT)₁₈ se recuece de forma selectiva con la cola poli(A) del ARNm. Los primers hexaméricos aleatorios no requieren la presencia de la cola poli(A), por lo que se pueden emplear para la transcripción de las regiones de extremo 5' del ARNm o la síntesis de especies de ARN que carecen de una cola poli(A) (p. ej., microARN). Con el kit también pueden emplearse cebadores específicos de genes.

El kit utiliza transcriptasa inversa RevertAid, cuya actividad de ARNasa H es más baja en comparación con la transcriptasa inversa AMV. El inhibidor de ARNasa RiboLock recombinante que se suministra con el kit protege con eficacia el molde de ARN de la degradación. Es totalmente compatible con la reacción de transcripción inversa, puesto que mantiene la actividad a temperatura hasta 55 °C. El oligo(dT)₁₈ se recuece de forma selectiva en la cola poli(A) del ARNm. Los primers hexámeros aleatorios no requieren la presencia de poli(A). Por lo tanto, pueden utilizarse para la transcripción de las regiones del extremo 5 del ARNm o para la síntesis del ADNc utilizando ARN sin cola poli(A); p. ej., micro ARN. Estos kits también permiten la utilización de cebadores específicos de genes. La primera cadena de ADNc puede emplearse directamente como molde en PCR (consulte el protocolo RT-PCR), en PCR en tiempo real o en síntesis de segunda cadena de ADNc (consulte el protocolo).

• Primera cadena de ADNc de longitud completa hasta 13 kb
• Mayor intervalo de temperatura de reacción, de 42° a 50 °C
• Suministrado con inhibidor de ARNasa RiboLock recombinante
• En el kit se incluyen cebadores completos: oligo(dT)₁₈ y cebadores hexaméricos aleatorios.

Recomendada para:

Síntesis de la primera cadena del ADNc para RT-PCR y real time RT-PCR (1, 2); construcción de bibliotecas de ADNc; creación de sondas para hibridación; síntesis de ARNa.