Thermo Scientific™ Uracil-DNA Glycosylase (1 U/μL)

Descripción

Uracil-DNA Glycosylase (UDG, UNG) cataliza la hidrólisis del enlace N-glicosílico entre el uracilo y el azúcar, dejando un sitio apirimidínico en el ADN monocatenario o bicatenario que contenga uracilo. La enzima no muestra actividad en el ARN.

• Activo en tampones Fermentas para enzimas de restricción y polimerasas termofílicas
• Fuente: Células E. coli K12
• Peso molecular: Monómero de 25,6 kDa

• Ausencia de otras endo o exodesoxirribonucleasas, fosfatasas y ribonucleasas confirmada mediante pruebas de calidad apropiadas

Fuente:

• Células E.coli K12

Peso molecular:

• Monómero de 25,6 kDa

Definición de unidad de actividad:

• Una unidad de la enzima cataliza la liberación de 1 nanomol de uracilo de la plantilla de ADN que contiene uracilo en 60 min. a 37 °C.

• 30 mM de Tris-HCl (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 1 mM de EDTA, 1 mM de DTT, 0,05 % (v/v) de Tween 20 y 50 % (v/v) de glicerol

Tampón de reacción 10X:

• 200 mM de Tris-HCl (pH 8,2 a 25 °C), 10 mM de EDTA, 100 mM de NaCl

• Inhibidores: Proteína Ugi del bacteriófago PBS2 de Bacillus subtilis, proteína p56 del bacteriófago phi29 de Bacillus subtilis (7).
• Inactivado por calor a 95 °C durante 10 min. La actividad enzimática se restaura parcialmente a temperaturas inferiores a 55 °C. Por lo tanto, coloque los productos de PCR en hielo después de la PCR y cárguelos directamente en un gel

Recomendada para:

Control de contaminación cruzada en PCR (2); detección de polimorfismos de un solo nucleótido mediados por glucosilasa (GMPD) (3); mutagénesis de sitio dirigido (4); sonda en estudios de interacciones de proteína-ADN (5); identificación de genotipos de SNP; clonación de productos de PCR (6); generación de salientes monocatenarios de productos de PCR y ADN complementario

Nota:

Los sitios abásicos formados en el ADN por Uracil-DNA Glycosylase pueden fragmentarse posteriormente mediante calor, tratamiento con álcalis o endonucleasas, que realizan la fragmentación específicamente en los sitios abásicos. UDG (UNG) está activa en presencia o ausencia de cationes divalentes.