Molecular Probes™ FluxOR™ Potassium Ion Channel Assay

Descripción

• Canal K⁺ específico: mida el flujo de iones en ambos canales de potasio activados por ligando y voltaje
• Rápido: realice cribados en modo de alto rendimiento con resultados reproducibles y excelente relación S/N sin colorante desactivador
• Farmacológicamente relevante: los bloqueadores conocidos muestran inhibición dependiente de la dosis en una gran ventana de señal

El ensayo de canal de iones de potasio FluxOR™ es un ensayo homogéneo y de base óptica para mediciones de cribado analítico masivo (HTS) del canal de iones de potasio y las actividades del transportador. El ensayo homogéneo se basa en la permeabilidad de los canales de potasio al talio I. Cuando los canales de potasio se abren mediante un estímulo, el flujo de talio del medio externo se detecta con un colorante indicador altamente sensible. La señal fluorogénica refleja cuantitativamente la actividad de los canales de iones y de los transportadores permeables al talio, incluyendo hERG, Kir2.1, y otros canales de potasio farmacológicamente importantes. La fluorescencia comunicada en el sistema FluxOR™ se convierte así en un indicador sustituto de actividad para cualquier canal de iones o transportador permeable al talio.

El ensayo de canal de iones de potasio FluxOR™ permite un cribado analítico masivo (HTS) rápido y sólido de objetivos de canal de potasio en una nueva medición de equilibrio, que ofrece valores de IC₅₀ reproducibles que predicen el bloqueo o la modulación en plataformas de menor rendimiento. El colorante FluxOR™ es lo suficientemente sensible como para que los niveles bajos de mM de talio extracelular den grandes señales en el modo de alto rendimiento. Para la mayoría de las aplicaciones, el colorante FluxOR™ se disuelve en el tampón HBSS fisiológico para cargarlo en las células, asistido por nuestra formulación Powerload™ patentada (número de catálogo P10020).

El ensayo de canal de iones de potasio FluxOR™ proporciona una solución concentrada de talio y todos los tampones necesarios, lo que permite la máxima flexibilidad y facilidad de funcionamiento en un formato homogéneo que se ha demostrado para su uso con células que expresan de forma estable hERG, así como nuestro reactivo de administración y expresión BacMam-HERG (número de catálogo B10019 y B10033). El canal de potasio hERG ADNc desarrollado en el sistema de administración y expresión BacMam de Invitrogen es opcional para su uso con este kit. La combinación de un colorante sensor de potasio fluorescente brillante patentado y el gen del canal de potasio hERG suministrado por BacMam proporciona una excelente flexibilidad de diseño de ensayo y una sensibilidad superior en la detección de la actividad del canal de potasio en sistemas biológicamente relevantes en condiciones fisiológicas sin necesidad de desactivadores.