Invitrogen™ GeneArt™ Gibson Assembly HiFi Master Mix

Descripción

GeneArt Gibson Assembly HiFi Master Mix enables DNA assembly and cloning via a technique that allows multiple overlapping DNA fragments to be seamlessly linked in a one-step, 15–60 minute isothermal reaction. DNA fragments of different lengths are uniformly assembled using complementary overlaps between fragments. The inherent flexibility of this approach is suitable for small and large DNA constructs and includes both single and multiple inserts. The resulting products can be used for a variety of downstream applications including transformation, PCR and rolling circle amplification (RCA). The GeneArt Gibson Assembly HiFi Master Mix kit includes master mix, positive control, and water and accommodates the use of your own competent cells.

La mezcla maestra GeneArt Gibson Assembly HiFi permite el ensamblaje de ADN a través de una técnica que permite que múltiples fragmentos de ADN superpuestos se puedan vincular sin problemas en una reacción isotérmica de un solo paso de 15 a 60 minutos. Los fragmentos de ADN de diferentes longitudes se ensamblan de manera uniforme utilizando superposiciones complementarias entre fragmentos. La flexibilidad inherente de este enfoque hace que sea adecuado para construcciones pequeñas y grandes de ADN, e incluye tanto inserciones simples como múltiples. Los productos resultantes pueden usarse para una variedad de aplicaciones posteriores, incluyendo la transformación, PCR y amplificación por círculo rodante (RCA). El kit de la mezcla maestra GeneArt Gibson Assembly HiFi incluye la mezcla maestra, el control positivo y el agua, y se adapta al uso de sus propias células competentes.

Las características de la mezcla maestra GeneArt Gibson Assembly HiFi incluyen:

• Simple: ensamble y clone hasta seis fragmentos de ADN en una sola reacción
• Eficaz: la alta fidelidad proporciona clones más correctos que otros métodos
• Flexible: las directrices de diseño permiten el ensamblaje en cualquier vector de su elección
• Práctica: disponible como kits de mezcla maestra y kits de clonación completos con células químicas o electrocompetentes
• Fiable: más de 4000 citas en publicaciones científicas que destacan su gran éxito

Ensamblaje perfecto de múltiples fragmentos

La clonación GeneArt Gibson Assembly HiFi es un proceso simple de un paso, por el que se combinan hasta seis fragmentos en una mezcla enzimática exclusiva para ensamblar fragmentos de ADN con homología de terminaciones compartidas sin dejar secuencias adicionales ni cicatrices (sin problemas). Después de una incubación de 15 a 60 minutos, una parte de la reacción de ensamblaje se transforma entonces en células químicamente competentes o electrocompetentes, lo que produce clones que están listos para su análisis al día siguiente. La homología de terminaciones de pares requerida de 20 a 40 bases está diseñada en el fragmento de novo para su síntesis o se puede crear con facilidad mediante la amplificación de PCR con oligonucleótidos de ADN personalizados. Esta mezcla de enzimas especiales crea una construcción de ADN unida sin problemas y covalente que proporciona una alta eficiencia.

Método sólido para una eficacia máxima

Debido al producto final unido covalentemente, el método GeneArt Gibson Assembly HiFi permite el uso de células químicamente competentes o células electrocompetentes para una mayor eficiencia de transformación, lo que aumenta las probabilidades de encontrar con éxito un clon correcto, especialmente para construcciones más desafiantes. No hay necesidad de enzimas de restricción, ligación, o sitios de recombinación, y el método proporciona una construcción sin problemas ni bases adicionales no deseadas.

Ofrece una gran versatilidad

El método GeneArt Gibson Assembly HiFi proporciona versatilidad, puede optimizar muchas técnicas mediante una combinación, adición, eliminación o intercambio rápidos de segmentos de ADN, y elimina la necesidad de subclonar, lo que ahorra tiempo y esfuerzo en el flujo de trabajo de clonación.