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Thermo Scientific™ North2South™ Biotin Random Prime DNA Labeling Kit
Produzca plantillas de ADN biotinilado para hibridación de ADN y métodos de detección utilizando heptanucleótidos aleatorios, fragmento Klenow y biotina-nucleótidos.
Marca: Thermo Scientific™ 17075
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Descripción
El kit Thermo Scientific™ North2South de cebado aleatorio para la biotinilación del ADN utiliza heptanucleótidos aleatorios, fragmento Klenow y nucleótidos de biotina para producir plantillas de ADN biotiniladas para métodos de hibridación y detección de ADN.
Los heptanucleótidos aleatorios que contienen todas las secuencias posibles se recuecen a una plantilla de ADN desnaturalizado. Estos actúan como primers para la síntesis complementaria de la cadena por ADN polimerasa. Los dNTPs biotinilados en la mezcla de reacción se incorporan al ADN recién sintetizado. Este protocolo ofrece ADN de alta calidad etiquetado con biotina para uso como sondas en experimentos de hibridación como las hibridaciones Southern y Northern Los híbridos resultantes se pueden detectar con la peroxidasa estreptavidina de rábano picante (HRP).Características destacadas:
- Gran sensibilidad: Etiquetas con dUTP biotinilado, maximizando la unión estreptavidina-HRP y aumentando la sensibilidad
- Funciona con tan solo una plantilla de ADN inicial de 100 ng
- El fragmento Klenow sin exonucleasas produce un mayor rendimiento
- Cada reacción produce una sonda suficiente para aproximadamente tres blots (10 x 10 cm)
Especificaciones
Suficiente para: 10 reacciones de marcado de biotina (cada una con 100 ng de ADN) • Mezcla de heptanucleótidos (5X), 100 µl • Mezcla de desoxinucleótidos (5X), 80 µl • Tampón de reacción (10X), 50 µl • ADN polimerasa fragmento Klenow (5U/µL), 10 µl • ADN de control (250 ng/µL), 5 µl • Acetato de amonio (5 M), 1 ml • EDTA (0,5 M, pH 8,0), 1 ml • Agua sin nucleasas, 1 ml • Biotina-11-dUTP, 20 µl Almacene todos los componentes a - 20 °C. |
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ADN | |
Kit de etiquetado de ADN |
Kit | |
North2South™ | |
10 reacciones |
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