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Invitrogen™ Kit de ELISA para AMPK alfa 1,2 (fosforilada) [pT172] humana

Código de producto. 10048712
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Cantidad:
96 pruebas
Tamaño de la unidad:
96 tests
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Marca: Invitrogen™ KHO0651

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Includes

Placa de 96 pocillos recubiertos de anticuerpos para AMPKα; patrón de AMPKα [pT172]; tampón diluyente estándar; anticuerpo de detección de AMPKα [pT172]; IgG-HRP anticonejo (100X); diluyente de HRP; concentrado de tampón de lavado (25X); cromógeno estabilizado, TMB; solución de parada; cubiertas de placa; protocolo detallado con pruebas de validación

Kit de ELISA tipo sándwich

El kit está diseñado para detectar y cuantificar el nivel de AMPK alfa 1,2 (fosforilada) [pT172] en lisados de células humanas frescos o congelados. Se ha observado reactividad cruzada en células de ratón y rata. El ensayo reconoce la AMPK alfa 1,2 (fosforilada) [pT172] humana tanto natural como recombinante. Principio del método Se ha recubierto un ac de captura monoclonal específico para AMPK alfa 1,2 (fosforilada) [pT172] en los pocillos de la placa de 96. Durante la primera incubación, los patrones y las muestras se pipetan en los pocillos y el antígeno se une al ac inmovilizado (captura). Después del lavado, se añade a los pocillos un ac de conejo específico para la proteína objetivo y sirve como ac de detección al unirse a la proteína inmovilizada capturada durante la primera incubación. Después del lavado, se añade un IgG anticonejo etiquetado como HRP. Esto se une al ac de detección para completar la estructura tipo sandwich. Después de una tercera incubación y lavado de la enzima no ligada, se añade una solución de sustrato (TMB), sobre la que actúa la enzima unida para producir color. La intensidad de este producto coloreado es directamente proporcional a la concentración de proteína diana presente en la muestra original y el D.E. puede leerse en un lector de microplacas. Validación rigurosa Cada lote ELISA se somete a pruebas de calidad como sensibilidad, especificidad, precisión y consistencia entre lotes. Consulte el manual para la validación.

La AMPK es un complejo heterotrimérico compuesto por una subunidad alfa catalítica y subunidades beta y gamma reguladoras. Protege a las células de las tensiones que provocan el agotamiento del ATP al desactivar las vías biosintéticas que consumen ATP. La AMPK se activa mediante AMP alto y ATP bajo a través de un mecanismo que implica regulación alostérica, la promoción de la fosforilación por una proteína cinasa de flujo ascendente conocida como cinasa AMPK y la inhibición de la desfosforilación. La AMPK activada puede fosforilar y regular in vivo hidroximetilglutaril-CoA reductasa y acetil-CoA carboxilasa, que son enzimas reguladoras clave de la síntesis de esterol y la síntesis de ácidos grasos, respectivamente. Los genes humanos AMPK alfa1 y AMPK alfa2 codifican una proteína de 548 aminoácidos y una proteína de 552 aminoácidos, respectivamente. La AMPK beta1 humana codifica una proteína de 271 aminoácidos y la AMPK beta2 humana codifica una proteína de 272 aminoácidos. El gen humano AMPK gamma1 codifica una proteína de 331 aminoácidos. La AMPK gamma2 y la AMPK gamma3 humanas, que son proteínas de 569 y 492 aminoácidos, respectivamente, contienen dominios N-terminales únicos y pueden participar directamente en la unión de AMP dentro del complejo AMPK.

Información de órdenes

Condición de envío: Hielo húmedo

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Especificaciones

Número de acceso P54645,P54646,Q09137,Q13131,Q5EG47,Q8BRK8
Intervalo del ensayo < 1 U/ml
Sensibilidad del ensayo < 1 U/ml
Concentración 1,6 U/ml
Conjugado Peroxidasa de rábano picante (HRP)
Tipo de producto Kit de ELISA
Tipo de muestra Lisados celulares
Tipo de sustrato Serina/treonina quinasa
Especies diana Ratón, rata
Para utilizar con (equipo) Lector de microplacas colorimétrico
ID de gen (Entrez) 105787, 108079, 5562, 5563, 65248, 78975
Símbolo de gen AMPK,AMPK2,AMPKa2,PRKAA,AMPK,AMPKa1
Tiempo de incubación 4 h
CV interensayo 7,6%
CV intraensayo 4,8%
Contenido del kit Placa de 96 pocillos recubiertos previamente, Estándar, Tampón de dilución estándar, Anticuerpo de detección, anticonejo-HRP, Diluyente HRP, Tampón de lavado, Cromógeno, Solución de parada, Cubiertas adhesivas para placas
Etiqueta o tinte Peroxidasa de rábano picante (HRP)
Gen marcador AMPK
Cantidad 96 pruebas
Estado normativo RUO
Volumen de muestra Lisado celular, 10 μL
Requisitos de almacenamiento De 2 °C a 8 °C
Objetivo Humano, ratón, rata
Tiempo de prueba 1 h 20 min
Tiempo total del ensayo 4 h
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

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