Invitrogen™ pHrodo™ BioParticles™ Conjugates for Phagocytosis and Phagocytosis Kit, for Flow Cytometry

Descripción

Achieve faster staining and more accurate results without the need for wash steps or quencher dye with pH-sensitive pHrodo BioParticles conjugates and phagocytosis kit for flow cytometry. pHrodo BioParticles conjugates for phagocytosis are non-fluorescent outside the cell at neutral pH but fluoresce brightly in acidic pH environments, such as those of endosomes and lysosomes. They can be used in imaging, HCA, and HTA applications. The pHrodo BioParticles phagocytosis kit offers rapid assessment of phagocytic activity in whole blood using flow cytometry.

La fluorescencia del tinte pHrodo se reduce en gran medida conforme disminuye el pH de neutro a ácido, por lo que es una herramienta ideal para estudiar la fagocitosis y su regulación mediante fármacos y/o factores medioambientales. Fuera de la celda, el tinte no es fluorescente, lo que elimina la necesidad de pasos de lavado y colorantes supresores. Una vez internalizado, el tinte muestra una fluorescencia brillante dentro de los ambientes ácidos de los endosomas y lisosomas, lo que permite el desarrollo rápido de ensayos y la certeza de los resultados al investigar las vías fagocíticas y su normativa por fármacos y/o factores ambientales. Por ejemplo, los conjugados de colorante pHrodo se pueden utilizar en lectores de placas, adquisición de imágenes de microscopía de fluorescencia y aplicaciones de citometría de flujo.

El conjugado para fagocitosis pHrodo Red S. aureus BioParticles (n.º de cat. A10010) ofrece resultados de ensayo rápidos y exactos. Los conjugados de tinte pHrodo Red no son fluorescentes fuera de la celda, pero presentan una fluorescencia brillante de color rojo en los fagosomas. El conjugado para fagocitosis pHrodo Red E. coli BioParticles (n.º de cat. P35361) detecta fagocitosis y endocitosis, ofrece una variabilidad de señal reducida y una temporización mejorada en experimentos sensibles, y se puede utilizar en aplicaciones multiplex con una amplia variedad de colorantes e indicadores azules, verdes y de color rojo lejano, como GFP, Fuo-4, calcein, NucBlue, CellEvent Caspase 3/7 Green, MitoSOX Green y Mitotracker Deep Red, entre muchos otros. La absorción óptima y la emisión de fluorescencia máxima del conjugado pHrodo Red BioParticles es de aproximadamente 560/585 nm, respectivamente. Sin embargo, el fluoróforo se excita fácilmente con el láser de iones de argón de 488 nm instalado en la mayoría de los citómetros de flujo.

Kit de fagocitosis pHrodo Red E. coli BioParticles (n.º de cat. A10025) para la citometría de flujo se ha diseñado para una medición rápida y cómoda de la actividad fagocítica en muestras de sangre completa mediante citometría de flujo. El kit incluye todos los reactivos necesarios para evaluar la ingestión de partículas y la lisis de eritrocitos.

El tinte pHrodo Deep Red es un tinte de sensor de pH de fondo bajo que no muestra ninguna señal en condiciones neutras y solo muestra fluorescencia en ambientes ácidos. El tinte pHrodo Deep Red permite una mejor discriminación de la carga internalizada desde fuera de la celda porque tiene un pKa aproximado de 5 y no muestra fluorescencia hasta que entra en el endosoma y el lisosoma tardío. El tinte pHrodo Deep Red se puede detectar mediante un conjunto de filtros fluorescentes Cy5 y se ha validado para su uso en diversas aplicaciones, como citometría de flujo, microscopía fluorescente, análisis de alto contenido (HCA) y detección de alta capacidad de procesamiento (HTS). También se puede multiplexar con una amplia variedad de colorantes azules, verdes y rojos, e indicadores como GFP y RFP, MitoSOX Green o Red, CellEvent Caspase 3/7 Green o Red, NucBlue o TMR, entre muchos otros.

El conjugado para fagocitosis pHrodo Deep Red E. coli BioParticles (n.º de cat. P35360) es un reactivo fluorogénico de bajo fondo y sin lavado desarrollado para el estudio de la fagocitosis en un sistema de células vivas. Este conjugado no es fluorescente fuera de la celda pero presenta una fluorescencia oscura de color rojo en los fagosomas. La baja pKa de los conjugados pHrodo Deep Red E. coli BioParticles elimina la señal no específica de la carga no internalizada y solo se enciende en endosomas y lisosomas tardíos.

Los conjugados de tinte pHrodo Green, como el pHrodo Red y pHrodo Deep Red ofrecen resultados más rápidos y exactos que cualquier otro ensayo de fagocitosis. Los conjugados pHrodo Green no son fluorescentes fuera de la celda con un pH neutro, pero tienen una fluorescencia de color verde brillante con el pH ácido, como el de los fagosomas. Utilice los conjugados listos para usar pHrodo Green S. aureus BioParticles (n.º de cat. P35367) y los conjugados pHrodo Green Zymosan biopArticles (n.º de cat. P35365) para la fagocitosis en aplicaciones de adquisición de imágenes, de HCA, de HTS y de flujo.

Estos productos de conjugado pHrodo incluyen suficiente reactivo para realizar 100 pruebas cuando se utilizan 100 µl en cada pocillo de una placa de 96 pocillos, y se pueden multiplexar con una amplia variedad de indicadores de tinte azul, rojo y rojo lejano, como MitoSOX Red, CellEvent Caspase 3/7 Red, NucBlue, RFP y Mitotracker Deep Red, entre muchos otros.

Conjugado pHrodo Red Zymosan BioParticles (n.º de cat. P35364) también está disponible y el tinte verde pHrodo está disponible como conjugado de E. coli BioParticles (n.º de cat. P35366).