Molecular Probes™ pHrodo™ Red and Green AM Intracellular pH Indicator Dyes

Descripción

Measure and quantify intracellular pH with pHrodo Red and Green AM indicator dyes, which are fluorogenic probes that traverse the cell membrane and remain within the intracellular space upon cleavage by nonspecific esterases. pHrodo Red and Green AM indicator dyes become increasingly fluorescent as the pH drops and can be used to quantify cytosolic pH in the range of 4–9. These indicator dyes can also be used in multiplex experiments within HCS, flow cytometry, microplate fluorometry, and HCS applications.

Los indicadores de pH intracelular pHrodo Red (n.º de cat. P35372) y Green (n.º de cat. P35373) AM son sondas fluorogénicas que se utilizan para medir el pH intracelular en células vivas. Son débilmente fluorescentes a pH neutro pero pasan a ser cada vez más fluorescentes a medida que el pH disminuye. Estos reactivos se pueden utilizar para cuantificar el pH citosólico celular en el intervalo de 4 a 9 con una pKa ∼6,5 y con espectros de excitación/emisión de 560/585 nm (pHrodo Red) o 509/533 nm (pHrodo Green).

Los colorantes indicadores de pH pHrodo Red y pHrodo Green son fotoestables y adecuados para su uso en experimentos de multiplexing. pHrodo Red se mutiplexa fácilmente con una amplia variedad de colorantes azules, verdes y rojos lejanos e indicadores como GFP, Fuo-4, calceína, NucBlue, CellEvent Caspase 3/7 verde, Mitosox Green y Mitotracker Deep Red, entre muchos otros. pHrodo Green se multiplexa fácilmente con una amplia variedad de colorantes azules, rojos y rojos lejanos, como Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Red, NucBlue, RFP y Mitotracker Deep Red, entre muchos otros.

Los colorantes pHrodo Red y Green con grupos de ésteres AM dan como resultado una molécula sin carga que puede permear las membranas celulares. Una vez dentro de la célula, los grupos de bloqueo lipofílico de los colorantes son escindidos por esterasas no específicas, lo que resulta en compuestos que se retienen dentro del espacio intracelular. La intensidad de fluorescencia de la sonda se convierte en un indicador del pH intracelular. El uso posterior del kit tampón de calibración de pH intracelular (n.º de cat. P35379) permite cuantificar este pH intracelular.

Los colorantes indicadores de pH intracelular pHrodo Red y Green AM son compatibles con varias plataformas, como la microscopía de fluorescencia tradicional, el detección de alto contenido (HCS), la citometría de flujo y la fluorimetría basada en microplacas o detección de alto rendimiento (HTS). Estos reactivos también son compatibles con microscopía de fluorescencia de campo ancho o confocal, citometría de flujo, lectores de placas de fluorescencia e instrumentos de alto contenido.