Thermo Scientific™ Phusion™ Plus DNA Polymerase

Descripción

Thermo Scientific Phusion Plus DNA Polymerase is a hot-start, high-fidelity DNA polymerase that brings together protein fusion technology and universal primer annealing. It is a Pyrococcus-like proofreading DNA polymerase fused to a processivity-enhancing domain, enabling Phusion Plus DNA Polymerase to generate PCR sequences with high accuracy, sensitivity, and inhibitor tolerance.

La ADN polimerasa Phusion Plus de Thermo Scientific es una ADN polimerasa de corrección similar a Pyrococcus fusionada a un dominio que mejora la capacidad de procesamiento, lo que permite que la ADN polimerasa Phusion Plus genere secuencias de PCR con alta precisión, sensibilidad y tolerancia a inhibidores.

• Alta fidelidad: proporciona una precisión de secuencia > 100 veces mayor que la polimerasa Taq
• Cómoda preparación: permite una temperatura de recocido universal de 60 °C en la PCR
• Mejor especificidad: el mecanismo de inicio en caliente reduce la amplificación no específica y la degradación del cebador
• Estabilidad de sobremesa: posibilidad de automatización debido a la estabilidad durante 24 horas de las reacciones montadas
• Alta tolerancia a inhibidores: funciona con ADN de pureza por debajo de lo óptimo

El novedoso tampón de reacción Phusion Plus incluye aditivos patentados que estabilizan los dúplex cebador/muestra durante el paso de recocido a 60 °C. Esta formulación de tampón única aumenta la especificidad de la PCR sin necesidad de optimizar la temperatura de recocido para cada par de cebadores, lo que ayuda a ahorrar tiempo y evitar errores al realizar las PCR. Además, con la ADN polimerasa Phusion Plus y su función de recocido universal, se pueden realizar ciclos de reacción de PCR diferentes mediante el mismo protocolo.

La ADN polimerasa Phusion Plus está inactiva a temperaturas ambiente debido a su mecanismo de incio en caliente mediado por moléculas de Affibody, lo que permite la preparación y el almacenamiento de las reacciones PCR montadas a temperatura ambiente. La actividad enzimática se restaura completamente después del paso inicial de desnaturalización.

Aplicaciones

• PCR de alta fidelidad
• Clonación
• Generación de moldes para secuenciación
• PCR con gran cantidad de GC
• PCR de largo alcance (hasta 20 kb)
• Mutagénesis
• PCR de alto rendimiento

Para simplificar la configuración de la reacción PCR, la ADN polimerasa Phusion Plus también está disponible en formatos de mezcla maestra listos para su uso. La mezcla maestra de PCR Phusion Plus es una cómoda mezcla de enzimas 2X, tampón de reacción, cloruro de magnesio y dNTP. Solo hay que añadir la muestra y los cebadores a la reacción PCR. La mezcla maestra de PCR Phusion Plus Green contiene además un reactivo de densidad y dos colorantes de seguimiento para la carga directa de productos de PCR en geles.