Thermo Scientific™ Phusion™ Plus PCR Master Mixes

Descripción

Thermo Scientific Phusion Plus Green PCR Master Mix is a convenient, ready-to-use 2X mixture of Phusion Plus DNA Polymerase, buffer, magnesium chloride, and dNTPs. The master mix format simplifies reaction setup with minimal pipetting steps and retains all features of Phusion Plus DNA Polymerase. Additionally, two tracking dyes and a density reagent are pre-added to the master mix for direct loading of PCR products on gels.

El formato de mezcla maestra de PCR Phusion Plus Green de Thermo Scientific simplifica la preparación de la reacción con pasos de pipeteo mínimos y conserva todas las características de la ADN polimerasa Phusion Plus. Además, se añaden previamente dos colorantes de seguimiento y un reactivo de densidad a la mezcla maestra para la carga directa de productos de PCR en geles.

• Alta fidelidad: proporciona una precisión de secuencia > 100 veces mayor que la polimerasa Taq
• Cómoda preparación: permite una temperatura de recocido universal de 60 °C en la PCR
• Mejor especificidad: el mecanismo de inicio en caliente reduce la amplificación no específica y la degradación del cebador
• Estabilidad de sobremesa: posibilidad de automatización debido a la estabilidad durante 24 horas de las reacciones montadas
• Alta tolerancia a inhibidores: funciona con ADN de pureza por debajo de lo óptimo

La ADN polimerasa Phusion Plus es una ADN polimerasa de alta fidelidad de inicio en caliente que combina la tecnología de fusión de proteínas y el recocido de cebadores universales. Es una ADN polimerasa de corrección similar a Pyrococcus fusionada a un dominio que mejora la capacidad de procesamiento, lo que permite que la mezcla maestra de PCR Phusion Plus Green genere secuencias de PCR con alta precisión, sensibilidad y tolerancia a inhibidores. Su novedoso tampón de reacción incluye aditivos patentados que estabilizan los dúplex cebador/muestra durante el paso de recocido a 60 °C. Esta formulación de tampón única aumenta la especificidad de la PCR sin necesidad de optimizar la temperatura de recocido para cada par de cebadores, lo que ayuda a ahorrar tiempo y evitar errores al realizar las PCR. Además, con la mezcla maestra de Verde PCR Phusion Plus Green y su función de recocido universal, se pueden realizar ciclos de reacción de PCR diferentes mediante el mismo protocolo.

La mezcla maestra de PCR Phusion Plus Green está inactiva a temperaturas ambiente debido a su mecanismo de inicio en caliente mediado por moléculas de Affibody, lo que permite la preparación y el almacenamiento de las reacciones PCR montadas a temperatura ambiente. La actividad enzimática se restaura completamente después del paso inicial de desnaturalización.

Aplicaciones

• PCR de alta fidelidad
• Clonación
• Generación de moldes para secuenciación
• Amplificación de muestras complejas (gran cantidad de GC)
• PCR de largo alcance (hasta 20 kb)
• Mutagénesis
• PCR de alto rendimiento