Thermo Scientific™ Inhibidores de la ARNasa RiboLock (40 U/μl)

Descripción

RiboLock ARNasa Inhibitor inhibe la actividad de las ARNasas A, B y C mediante su unión de forma no competitiva en una proporción 1:1. No inhibe las ARNasas eucariotas T1, T2, U1, U2 y CL3, ni las ARNasas procariotas I y H.

• No inhibe las RNasas eucariotas T1, T2, U1, U2 y CL3, ni las RNasas procariotas I y H.
• Funciona con una amplia gama de condiciones de reacción
• Protege el ARN de la degradación a temperaturas de hasta 55 °C

• Ausencia de otras endo o exodesoxirribonucleasas, fosfatasas y ribonucleasas confirmada mediante pruebas de calidad apropiadas
• Probado funcionalmente en síntesis de ARN y ADNc

• Células de E. coli con un gen clonado que codifica el inhibidor de la ribonucleasa de mamíferos

• Monómero de 49,6 kDa Definición de unidad de actividad:
  • Una unidad del inhibidor de la ARNasa RiboLock inhibe la actividad de 5 ng de ARNasa A en un 50 %
  • La actividad inhibidora se analiza en la siguiente mezcla: 100 mM de Tris-HCl (pH 7,5), 1,2 mM de EDTA, 0,1 mg/ml de BSA, 100 ng/ml de ARNasa A, 0,1 mg/ml de[ ³H]-ARN, 50 mg/ml de levadura de ARN, 8 mM de DTT
  Tampón de almacenamiento:
  • La enzima se suministra en: 20 mM de HEPES-NaOH (pH 7,5), 50 mM de NaCl, 8 mM de DTT, 0,5 mM de detergente ELUGENT y 50 % (v/v) de glicerol
  Inhibición e inactivación
  • Inhibidores: desnaturalizantes comunes (SDS, urea y todos los agentes oxidantes [p-cloromercuribenzoato, oxígeno disuelto, iones en sus estados máximos de oxidación]) inhiben considerablemente a RiboLock RNase Inhibitor y liberan la unión de la RNasa
  • Inactivado por calor a 75 °C durante 10 min. Actividad residual detectable tras 10 min. de calor a 70°

  Recomendada para:

  • Inhibición de la degradación del ARN en los siguientes casos: transcripción in vitro (1), síntesis de ADNc (2), traslación in vitro (3), aislamiento de fracciones de células de mamíferos que contienen el complejo de proteína mRNA
  • Purificación y almacenamiento de ARN
  • Separación e identificación de actividades específicas de ribonucleasa
  • Estudios de supresión tumoral

  Nota:

  • El DTT suministrado en el tampón de almacenamiento garantiza la estabilidad durante el almacenamiento a largo plazo, pero no es necesario para la actividad del inhibidor
  • La concentración recomendada es de 1 u/μl de una mezcla de reacción.