Invitrogen™ Kit TOPO™ TA Cloning™ para subclonación, sin células competentes

Descripción

Cada kit utiliza el vector pCR™ 2.1-TOPO TA con prácticos sitios de restricción para subclonación. Los kits de clonación están disponibles con una serie de células competentes (disponibles por separado), o sin ellas, dependiendo de sus necesidades y presupuesto. Resistente a kanamicina (KanR) y Zeocin™ (ZeoR).

Vector pCR™ 2.1-TOPO TA: simplicidad de clonación y subclonación
El vector pCR 2.1-TOPO TA se linealiza con los salientes 3'-timidina (T) para el ligamiento directo de los productos de PCR amplificados con Taq polimerasa (clonación TA) y se «activa» con topoisomerasa I unida covalentemente. No hay necesidad de añadir ligasa y la clonación se completa en 5 minutos. Los sitios EcoRI que flanquean el sitio de inserción del producto de PCR permiten una sencilla escisión de insertos o usar cualquier combinación de 15 prácticos sitios de restricción que flanquean el inserto de PCR para una sencilla subclonación direccional.

Manipulación y selección de clones de pCR 2.1-TOPO TA
El vector pCR 2.1-TOPO TA contiene marcadores de resistencia de ampicilina y kanamicina y el gen LacZα para detección azul/blanco.

Clonación simplificada basada en TOPO
Mediante la tecnología de clonación TOPO, no hay necesidad de emplear primers de PCR que contengan secuencias específicas procedimientos posteriores a la PCR, preparación de vectores u otros pasos de manipulación de ADN que consumen mucho tiempo. Solo tiene que añadir la reacción de PCR directamente al vector cargado con la topoisomerasa suministrado, incubar 5 minutos y transformar con las células competentes de E. coli.

Clonación eficiente
Con hasta un 95 % de los clones transportado al inserto deseado, podrá filtrar menos clones y ahorrar tiempo y dinero. El vector pCR 2.1-TOPO TA utilizado en este kit se suministra con salientes 3T para una ligación eficaz de los productos PCR amplificados con Taq polimerasa, que contienen salientes 3A.

La referencia en clonación
En el campo de la clonación, la tecnología de clonación TOPO ha sido un socio fiable durante más de diez años para miles de científicos. Rápida, fácil de usar y eficiente, la clonación TOPO se ha aplicado a muchos vectores distintos para multitud de aplicaciones.

Kits TOPO TA Cloning para subclonación: opciones de kits
El kit TOPO TA Cloning para secuenciación puede adquirirse con diversas células competentes que ofrecen distintas ventajas dependiendo de sus necesidades:

• Clonación general: Células TOP10 (n.º de cat. K4500-01, K4500-40)
• Clonación de gran eficacia: Células TOP10 Electrocomp™ (n.º de cat. K4560-01, K4560-40)
• Clonación general, resistencia T1 bacteriófaga: Células DH5α-T1R (n.º de cat. K4520-01, K4520-40)
• Crecimiento rápido: E. Coli Mach1™ -T1R químicamente competente (n.º de Nº K4510-20)
• Utilice sus propias células: flexibilidad y ahorro (n.º de cat. 450641)

• Rápido y fácil: de PCR a clones en solo tres pasos y en tan solo 5 minutos de manipulación
• Eficiente: obtenga hasta el 95 % de clones con el inserto adecuado
• Probado: rendimiento fiable durante más de una década con más de 4000 citas
• Sencillo: no se requieren ligasas, procedimientos posteriores a la PCR ni primers de PCR con secuencias específicas
• Vector: Vector pCR 2.1-TOPO TA: vector de subclonación con 15 prácticos sitios de restricción que flanquean al inserto para una subclonación direccional sencilla
• Método de clonación: TOPO TA Cloning: Ligadura en 5 minutos basada en topoisomerasa I de productos de PCR con salientes 3′-A (amplificados con polimerasa Taq) al vector TOPO con salientes T
• Células competentes: Varias opciones: seleccione entre kits con células generales, de alta eficacia, con resistencia T1 bacteriófaga y competentes (disponibles por separado) de rápido crecimiento o utilice las suyas propias

Clonación, clonación por PCR