El sistema SuperScript III One-Step RT-PCR con DNA polimerasa Platinum Taq utiliza una formulación práctica de un solo paso para realizar tanto la síntesis de ADNc como la amplificación de PCR en un solo tubo mediante cebadores específicos de genes y ARN objetivo de ARN total o ARNm. El sistema utiliza una mezcla de transcriptasa inversa SuperScript III y ADN polimerasa Platinum Taq en un tampón de reacción optimizado, y puede detectar una gran variedad de objetivos de ARN, desde 200 pb hasta 4,5 kb. La cantidad de material de partida puede oscilar entre 0,01pg y 1 μg de ARN total.
Sensibilidad: detección rutinaria de hasta solo 0,01 pg de ARN total.
Comodidad: formato de un paso que ofrece rapidez, comodidad y una menor variabilidad entre reacciones
Especificidad: utiliza RT SuperScript III para la síntesis de ADNc hasta 55 °C, para un cebado más específico con cebadores específicos de genes.
Tamaño del amplicón: detección compatible de objetivos de hasta 4,5 kb de longitud para una mayor flexibilidad
Transcriptasa inversa SuperScript III La transcriptasa inversa SuperScript III es una versión de la transcriptasa inversa (RT) del virus de la leucemia murina de Moloney (M-MLV) que se ha diseñado para reducir la actividad de la RNAsa H y proporcionar mayor estabilidad térmica. La enzima puede sintetizar ADNc en un intervalo de temperatura de 45 a 60 °C, y proporcionar una mayor especificidad, mayor producción de ADNc y más cantidad de producto de cadena completa que otras transcriptasas inversas. Puesto que la transcriptasa inversa SuperScript III no se ve significativamente inhibida por el ARN de transferencia y ribosómico, se puede emplear para sintetizar ADNc a partir de ARN total. ADN polimerasa Platinum Taq La ADN polimerasa Platinum Taq es una ADN polimerasa Taq recombinante que incluye un anticuerpo patentado que bloquea la actividad polimerasa a temperatura ambiente. La actividad se restablece después del paso de desnaturalización del ciclo de PCR a 94°C, y proporciona un sistema automático de “inicio en caliente” en la PCR para mayor sensibilidad, especificidad y rendimiento. Tamaño del producto final: 4,5 kb o menos.
RT-PCR en un paso, PCR y PCR en tiempo real, RT-PCR, transcripción inversa
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