Invitrogen™ SuperScript™ III CellsDirect™ cDNA Synthesis Kit

Descripción

El kit de síntesis de ADNc SuperScript™ III CellsDirect™ utiliza un protocolo sencillo que tarda menos de dos horas en completarse. La lisis y la transcripción inversa se realizan en el mismo tubo, y el ADNc de primera cadena resultante está listo para usarse en la clonación y PCR.

• Compatible con una amplia gama de tipos de células de mamíferos cultivados bajo diferentes condiciones de tratamiento
• El formato de un solo tubo minimiza la pérdida de reactivos, la pérdida de muestras y el tiempo de manipulación
• El volumen total de lisado se utiliza en la reacción de síntesis de la primera cadena del ADNc, proporcionando mayores rendimientos con un número limitado de células y permitiendo la detección de transcripciones raras
• La transcriptasa inversa SuperScript™ III, con una actividad de ARNasa H reducida y una mayor estabilidad térmica, genera una alta producción de ADNc en la reacción de síntesis de primera cadena para obtener una mayor sensibilidad y una mejor detección de transcripciones raras.
• Genera ADNc de alta calidad para su uso en una variedad de aplicaciones, incluyendo clonación y PCR

Funcionamiento
En la RT-PCR tradicional, el ARN se aísla primero de las células en un procedimiento que requiere mucho tiempo y puede provocar una pérdida de material. Mediante el sistema de síntesis de ADNc SuperScript™ III CellsDirect, las células se lisan y el ADNc se genera a partir del lisado en un único tubo con una manipulación mínima y sin pérdida de muestras. La ADNasa I se añade para eliminar el ADN genómico antes de la síntesis de primera cadena. Este kit se ha optimizado para muestras de células pequeñas, que van desde 10.000 células hasta una sola celda (medida por dilución en serie). El uso de la transcriptasa inversa SuperScript™ III asegura una alta especificidad y una alta producción de ADNc a partir de pequeñas cantidades de materiales de partida (de tan solo 10 pg de ARN total). Después de la síntesis, la primera cadena de ADNc se puede amplificar con cebadores específicos mediante PCR sin extracciones orgánicas intermedias ni precipitaciones de etanol.