Thermo Scientific™ Kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR

Descripción

El kit de síntesis de la primera cadena de ADNc Maxima para RT-qPCR es un práctico sistema optimizado para la síntesis de ADNc en aplicaciones de RT-PCR cuantitativo (RT-qPCR) de dos pasos. El kit utiliza la transcriptasa inversa Maxima, una enzima avanzada que se obtiene mediante la evolución in vitro de la transcriptasa inversa M-MuLV. La enzima ofrece una termoestabilidad elevada, resistencia y una mejor tasa de síntesis de ADNc en comparación con la transcriptasa inversa M-MuLV natural.

El kit de síntesis de ADNc de primera cadena Thermo Scientific Maxima para RT-qPCR es un práctico sistema optimizado para la síntesis de ADNc en aplicaciones de RT-PCR cuantitativo (RT-qPCR) de dos pasos. El kit utiliza la transcriptasa inversa Maxima, una enzima avanzada que se obtiene mediante la evolución in vitro de la transcriptasa inversa M-MuLV. La enzima ofrece una termoestabilidad elevada, resistencia y una mejor tasa de síntesis de ADNc en comparación con la transcriptasa inversa M-MuLV natural.
El kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR es capaz de realizar la síntesis reproducible de ADNc a partir de una amplia variedad de cantidades de ARN total (de 1 pg a 5 μg) a temperaturas elevadas (de 42 a 65 °C).La reacción de síntesis se puede completar en un periodo de 15 a 30 minutos. Los componentes del kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR vienen premezclados para ahorrar tiempo y reducir la posibilidad de errores de pipeteo.
El nuevo kit de síntesis de la primera cadena de ADNc Maxima simplifica en gran medida el flujo de trabajo, pues combina la eliminación de ADN genómico y la síntesis de ADNc en un procedimiento de un tubo. El kit contiene una nueva desoxirribonucleasa (ADNasa) específica bicatenaria diseñada para eliminar el ADN genómico contaminante de las preparaciones de ARN en cuestión de 2 minutos sin dañar la calidad o la cantidad de ARN. Gracias a la alta especificidad de la actividad de las desoxirribonucleasas (ADNasa) bicatenarias hacia el ADN bicatenario, se garantiza que el ADN monocatenario (como ADNc y primers) no se escinda y que el ARN tratado con ADNasa bc se puede añadir directamente a la transcripción inversa.

Características destacadas

• Paso de extracción de ADNg integrada
• Alta producción de ADNc de longitud completa de hasta 20 kb.
• Síntesis eficaz de ADNc en un amplio intervalo de temperatura, de 42°C a 65°C.
• Mayor velocidad de síntesis: complete la síntesis de ADNc en un periodo de 15 a 30 minutos.
• Alta sensibilidad y especificidad.

Aplicaciones

• RT-PCR de dos pasos
• RT-qPCR de dos pasos

Incluye
El kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR contiene

• La mezcla enzimática Maxima la transcriptasa inversa Maxima y el inhibidor de ARNasa RiboLock.
• Mezcla de reacción 5X (tampón de reacción, dNTP, oligo (dT)₁₈ y primers hexaméricos aleatorios)
• agua libre de nucleasas

El kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima con DNAsa bicatenaria contiene

• La mezcla enzimática Maxima la transcriptasa inversa Maxima y el inhibidor de ARNasa RiboLock.
• Mezcla de reacción 5X (tampón de reacción, dNTP, oligo (dT)18 y primers hexaméricos aleatorios)
• ADNasa bc
  • Tampón de ADNasa bc 10X
• agua libre de nucleasas

Información adicional acerca de los componentes de reacción
El inhibidor recombinante de la ARNasa RiboLock, incluido en la mezcla de enzimas Maxima, protege de forma eficaz las plantillas de ARN de la degradación producida por las ARNasas A, B y C a temperaturas de hasta 55°C.

El kit se suministra con Oligo(dT)₁₈ y primers hexaméricos aleatorios. Los cebadores hexámeros aleatorios realizan uniones no específicas y se utilizan para sintetizar ADNc de todos los ARN de una población de ARN. El primer oligo(dT)₁₈ se recuece de forma selectiva con el extremo 3’ de ARN poli(A) y sintetiza únicamente ADNc del ARNm con extremo poli(A). También pueden utilizarse con el kit cebadores específicos de genes para cebar la síntesis a partir de una secuencia especificada.

Se suministra agua sin nucleasa para preparar la reacción y diluir la muestra de ARN. La ausencia de endo y exodeoxiribonucleasas, ribonucleasas y fosfatasas se ha confirmado mediante las pruebas de calidad adecuadas.

Kit de síntesis de la primera cadena de ADNc Maxima Universal
Solamente está disponible en EE. UU. y Canadá

El kit de síntesis de la primera cadena de ADNc Maxima Universal se diferencia del kit de síntesis de la primera cadena de ADNc Máxima por que cuenta con un kit separado.

Peligroso: No
Control de calidad:

• Se probó funcionalmente en RT-qPCR en dos pasos utilizando diferentes cantidades iniciales (de 5 ng a 0,5 fg) de transcripción de ARN en reacciones de transcripción inversa seguidas de amplificación con mezcla maestra para qPCR Maxima SYBR Green/ROX.
• La eficiencia se encuentra entre el 90 y el 110 %, la pendiente es de entre -3,09 y -3,58 con un coeficiente de correlación de > 0,99.

Condición de envío: Hielo seco
Estado de almacenamiento: −20 °C